BPP-Studien werden verwendet, um die In-vitro-Blut-zu-Plasma-Teilung eines Testartikels im Blut von verschiedenen Spezies, einschließlich Menschen, zu bestimmen.
- Testsystem: Das von jeder Tierart gewonnene Blut kann von mindestens drei Spendern gepoolt werden. Menschliches Blut, das von mindestens drei Probanden gewonnen wurde, wird nicht gepoolt.
- Hämatokritwerte werden für die gepoolten Tierblutproben und die einzelnen menschlichen Blutproben bestimmt.
- Das Blut wird bei 2–8 °C gelagert und so bald wie möglich innerhalb von 1 Woche nach Erhalt verwendet.
Der Testartikel wird dem Blut zugesetzt und es werden erste zu untersuchende Teilmengen, Aliquote, entnommen. Angereichertes Blut wird wie angegeben bei 37 °C inkubiert. Nach der Inkubation werden Aliquote zur Analyse entnommen. Verbleibendes Blut wird zentrifugiert, um Plasma zu gewinnen; Aliquote werden zur Analyse gesammelt und mit den ursprünglichen Aliquoten verglichen.
- Stabilität in der Matrix: Der Testartikel wird für bis zu vier Zeitpunkte in einer einzigen Konzentration in Blut inkubiert.
- Zeit zum Gleichgewicht: Der Testartikel wird dem Blut in einer einzigen Konzentration für bis zu vier Zeitpunkte zugesetzt.
- Abhängigkeit der Proteinbindungskonzentration: Der Testartikel wird dem Blut bei bis zu 5 Konzentrationen zugesetzt und bis zum Gleichgewichtszeitpunkt inkubiert.
Bei radioaktiv markierten Testartikeln werden Blutaliquote vor der Flüssigszintillationszählung (LSC) aufgelöst. Bei nicht radioaktiv markierten Testartikeln werden die Blutaliquote vor der Extraktion und Analyse mittels Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS) lysiert.